Επισκόπηση

Το τεστ SP263 είναι ένα κλωνικό αντίσωμα κουνελιού που χρησιμοποιείται στην ανοσοϊστοχημεία για την ποσοτικοποίηση του PD-L1 στα καρκινικά κύτταρα, και η κλινική του σημασία εξαρτάται από μια ακριβή λεπτομέρεια: ποιο κλωνικό αντίσωμα χρησιμοποιείτε αλλάζει αυτό που βλέπετε κάτω από το μικροσκόπιο. Το SP263 διαφέρει από τους ανταγωνιστές όπως το 22C3 και το 28-8 στην περιοχή πρόσδεσης και την ένταση χρωματισμού, αλλά δείχνει υψηλή συμφωνία με το 22C3 για την βαθμολόγηση των καρκινικών κυττάρων.

Πώς Λειτουργεί το Αντίσωμα SP263 σε Μοριακό Επίπεδο

Το SP263 είναι ένα κλωνικό αντίσωμα κουνελιού IgG1 που κατευθύνεται έναντι του εξωκυττάριου πεδίου του ανθρώπινου PD-L1. Εφαρμοσμένο σε τμήματα σταθεροποιημένα με φορμόλη και ενσωματωμένα σε παραφίνη, προσδένεται στο PD-L1 στις μεμβράνες των καρκινικών κυττάρων και, σε ορισμένους ιστούς, στα διηθητικά ανοσοκύτταρα του όγκου. Το προσδεδεμένο αντίσωμα οπτικοποιείται μέσω ενός συστήματος ανίχνευσης συνδεδεμένου με ένζυμο — συνήθως ένα σύζευγμα υπεροξειδάσης χρένου και DAB — παράγοντας ένα καφέ σήμα μεμβράνης.

Η συμπεριφορά του τεστ καθορίζεται από την ειδικότητα και την αραίωση του αντισώματος. Το SP263 γενικά παράγει πιο έντονο, καθαρότερο χρωματισμό μεμβράνης από ορισμένους κλώνους, γι' αυτό επικυρώθηκε σε ενδείξεις, συμπεριλαμβανομένου του ουροθηλιακού καρκινώματος, όπου η βαθμολόγηση των ανοσοκυττάρων έχει σημασία. Η έκφραση του PD-L1 είναι ετερογενής εντός ενός όγκου, επομένως η αξία του τεστ εξαρτάται από μια τυποποιημένη μέθοδο βαθμολόγησης.

Ανάγνωση της Βαθμολογίας Αναλογίας Όγκου (TPS)

Η Βαθμολογία Αναλογίας Όγκου ποσοτικοποιεί το PD-L1 μόνο στα καρκινικά κύτταρα: το ποσοστό των βιώσιμων καρκινικών κυττάρων που εμφανίζουν μερικό ή πλήρη χρωματισμό μεμβράνης σε οποιαδήποτε ένταση. Στον μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα, τα καθοριστικά όρια είναι 1% και 50%. Κάτω από 1% είναι αρνητικό. 1% έως 49% είναι χαμηλά θετικό, συχνά οδηγώντας σε συνδυασμένη χημειοθεραπεία και ανοσοθεραπεία. 50% ή υψηλότερο πληροί τις προϋποθέσεις για μονοθεραπεία αποκλεισμού PD-1/PD-L1.

Η ακριβής ανάγνωση TPS απαιτεί αυστηρή επιλογή πεδίου. Οι παθολογοανατόμοι βαθμολογούν μόνο βιώσιμα καρκινικά κύτταρα, αποκλείουν τη νέκρωση και μετρούν μόνο τον χρωματισμό της μεμβράνης — ο χρωματισμός μόνο κυτταροπλασματικός δεν μετράει. Το SP263 μπορεί να προκαλέσει υπερβολική βαθμολόγηση, επομένως τα εργαστήρια θα πρέπει να καθοδηγούν τους αναγνώστες σε ένα επικυρωμένο σύνολο εκπαίδευσης.

Συνδυασμένη Θετική Βαθμολογία έναντι TPS: Πότε Εφαρμόζεται η Καθεμία

Η Συνδυασμένη Θετική Βαθμολογία (CPS) επεκτείνει την καταμέτρηση πέρα από τα καρκινικά κύτταρα: PD-L1-θετικά καρκινικά κύτταρα συν PD-L1-θετικά ανοσοκύτταρα, διαιρεμένα με το σύνολο των βιώσιμων καρκινικών κυττάρων, πολλαπλασιασμένα επί 100. Επειδή ο παρονομαστής παραμένει η καταμέτρηση των καρκινικών κυττάρων, η CPS μπορεί να υπερβεί το 100 όταν ο χρωματισμός των ανοσοκυττάρων είναι πυκνός. Η CPS είναι η τυπική ένδειξη σε γαστρικούς, οισοφαγικούς, τραχηλικούς και ουροθηλιακούς καρκίνους.

Η επιλογή μεταξύ TPS και CPS δεν είναι προαιρετική — επικυρώνονται σε διαφορετικούς τύπους όγκων. Στον καρκίνο του πνεύμονα, το TPS είναι καθιερωμένο. Σε πολλούς καρκίνους του ανώτερου γαστρεντερικού και του ουρογεννητικού συστήματος, απαιτείται η CPS. Η ερμηνεία του SP263 πρέπει να ταιριάζει με τη μετρική που έχει εγκριθεί για την ένδειξη.

Συχνές Ερωτήσεις

Ε: Με τι προσδένεται το αντίσωμα SP263 και πώς ανιχνεύεται; Α: Το SP263 είναι ένα κλωνικό αντίσωμα κουνελιού έναντι του εξωκυττάριου πεδίου του PD-L1. Προσδένεται στο PD-L1 στις μεμβράνες καρκινικών και ανοσοκυττάρων και οπτικοποιείται με ένα σύστημα χρωμογόνου ανίχνευσης DAB συνδεδεμένο με ένζυμο.

Ε: Ποια είναι η διαφορά μεταξύ Βαθμολογίας Αναλογίας Όγκου και Συνδυασμένης Θετικής Βαθμολογίας; Α: Το TPS μετρά μόνο τα PD-L1-θετικά καρκινικά κύτταρα ως ποσοστό όλων των καρκινικών κυττάρων, που χρησιμοποιείται κυρίως στον καρκίνο του πνεύμονα με όρια 1% και 50%. Η CPS προσθέτει επίσης PD-L1-θετικά ανοσοκύτταρα στον αριθμητή, με σταθερό παρονομαστή καρκινικών κυττάρων, και χρησιμοποιείται σε γαστρικούς, οισοφαγικούς, τραχηλικούς και ουροθηλιακούς καρκίνους.

Ε: Γιατί έχει σημασία η επιλογή του κλώνου αντισώματος αν οι κλώνοι είναι συμφωνούντες; Α: Οι κλώνοι διαφέρουν στην περιοχή πρόσδεσης και την ένταση χρωματισμού. Ενώ το SP263 και το 22C3 δείχνουν υψηλή συμφωνία για τη βαθμολόγηση των καρκινικών κυττάρων, η τυποποίηση έχει σημασία: η μετρική βαθμολόγησης πρέπει να ταιριάζει με την ένδειξη και το επικυρωμένο τεστ για να παραμένει συγκρίσιμη με τα δεδομένα των κλινικών δοκιμών.