Σύνοψη

Η ανίχνευση έκφρασης PD-L1 με τον κλώνο SP263 χρησιμοποιεί ανοσοιστοχημεία για την απεικόνιση της πρωτεΐνης PD-L1 σε τμήματα όγκου που είναι στερεωμένα με φορμαλίνη και ενσωματωμένα με παραφίνη.Το αντισώμα SP263 είναι ένα μονοκλωνικό αντιδραστήρα κουνελιού που αναπτύχθηκε για την αυτοματοποιημένη πλατφόρμα χρωματισμού VENTANA, και χρησιμεύει ως συνοδευτική διάγνωση που βοηθά στον προσδιορισμό της καταλληλότητας για διάφορους αναστολείς του ανοσολογικού σημείου ελέγχου.Η κατανόηση της αρχής της δοκιμής διευκρινίζει γιατί τα αποτελέσματα αναφέρονται ως ποσοστό των χρωματισμένων κυττάρων και όχι ως απλή θετική ή αρνητική κλήση..

Η Αρχή της Χρωματισμού

Η μέθοδος ξεκινά με την εφαρμογή του αντισώματος κατά του PD- L1 σε μια λεπτή ταινία ιστού, όπου δεσμεύεται με την πρωτεΐνη PD- L1 που εκφράζεται στην κυτταρική μεμβράνη.Ένα δευτερογενές σύστημα ανίχνευσης αποθέτει ένα χρωμογόνο που κάνει τα συνδεδεμένα σημεία ως ένα ορατό καφέ σημάδι κάτω από το μικροσκόπιοΕπειδή το PD-L1 βρίσκεται στην επιφάνεια των κυττάρων, η βαθμολογία επικεντρώνεται στη μεμβρανική χρωματισμό και η ένταση ερμηνεύεται σε σχέση με επικυρωμένα κατώτατα όρια αντί να εκτιμάται μόνο με το μάτι.

Διαβάζοντας το ποσοστό του όγκου

Οι παθολόγοι αξιολογούν το ποσοστό των βιώσιμων καρκινικών κυττάρων που παρουσιάζουν μερική ή πλήρη χρωματισμό της μεμβράνης, μια προσέγγιση γνωστή ως βαθμολογία αναλογίας όγκου.Διαφορετικοί διαγνωστικοί ισχυρισμοί χρησιμοποιούν διαφορετικά όρια: για παράδειγμα, η ατεζολιζουμάμπα στον μη μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα συνδέεται με ένα κατώτατο όριο τουλάχιστον 1% χρωματισμού των καρκινικών κυττάρων,ενώ το cemiplimab σε ορισμένες ενδείξεις χρησιμοποιεί υψηλότερο όριο των κυττάρων του όγκουΗ ίδια ανάλυση SP263 μπορεί επομένως να υποστηρίξει πολλαπλές αποφάσεις ανοσοθεραπείας ανάλογα με τον ισχύοντα κανόνα βαθμολόγησης.

Γιατί έχει σημασία η επιλογή των κλώνων;

Οι δοκιμές PD-L1 δεν είναι εναλλάξιμες, επειδή κάθε κλώνος αντισωμάτων αναγνωρίζει ένα ελαφρώς διαφορετικό επιτόπιο και κάθε πλατφόρμα έχει τη δική της χημεία χρωματισμού.Τα εργαστήρια θα πρέπει να αναφέρουν τον ακριβή κλώνο και τον αλγόριθμο βαθμολόγησης που χρησιμοποιήθηκε, ώστε ο κλινικός γιατρός να μπορεί να ταιριάξει το αποτέλεσμα με την σωστή ετικέτα του φαρμάκου.Μια σαφώς τεκμηριωμένη, τυποποιημένη ροή εργασίας προστατεύει την κλινική σημασία της βαθμολογίας σε όλες τις τοποθεσίες.

Προαναλυτικοί παράγοντες που επηρεάζουν το σκορ

Η σταθεροποίηση που είναι πολύ μεγάλη ή πολύ μικρή μπορεί να αλλάξει τη διατήρηση αντιγόνου μεμβράνης και το χαμηλό περιεχόμενο του όγκου αφήνει πολύ λίγα κύτταρα για να σημειωθεί αξιόπιστα.Τα εργαστήρια θα πρέπει να καθορίζουν αποδεκτούς χρόνους στερέωσης και ελάχιστη περιοχή του όγκου πριν από τη χρωματισμό.Ένα αποτέλεσμα που αναφέρεται με το προαναλυτικό του πλαίσιο είναι πολύ πιο αξιόπιστο από έναν αριθμό που εκδίδεται χωρίς προειδοποιήσεις.

Γενικές ερωτήσεις

Ε:Τι μετράει πραγματικά το SP263;Α:Μετρά την πρωτεΐνη PD- L1 σε κυτταρικές μεμβράνες σε ένα τμήμα ιστού με χρωμογενή ανοσοιστοχημεία, εκφρασμένη ως ποσοστό χρωματισμένων καρκινικών κυττάρων.

Ε:Είναι όλες οι δοκιμές PD-L1 εναλλάξιμες;Α:Όχι, διαφορετικοί κλώνοι αντισωμάτων και πλατφόρμες επικυρώνονται ξεχωριστά, έτσι ώστε ο κλώνος που αναφέρεται και ο κανόνας βαθμολόγησης πρέπει να ταιριάζουν με την προβλεπόμενη θεραπεία.

Ε:Γιατί το αποτέλεσμα είναι ποσοστό αντί για ναι ή όχι;Α:Οι συμπληρωματικές διαγνωστικές αξιώσεις συνδέονται με τα όρια αναλογίας, οπότε η βαθμολογία πρέπει να αντικατοπτρίζει πόσα κύτταρα όγκου εκφράζουν τον δείκτη.